检验科酶免长孵育二步法试剂用于血源筛查
为进一步保证血液质量,确保临床供血安全,依据《中国药典》(2010年版)规定,自 2010年10月1日起生产的用于血源筛查的酶联免疫吸附法诊断试剂盒(HBsAg/HCV抗体/HIV抗体/TP抗体),检测方法须由原来的短孵育一步法更换为长孵育二步法。
简单来说,酶免短孵育一步法(下简称一步法)检测是指标本加入反应板后直接加入酶结合物共同孵育一定时间(约60分钟),洗涤后加底物显色15分钟。酶免长孵育二步法(下简称二步法)检测是指标本加入反应板后必须孵育60分钟,洗涤后再加入酶结合物孵育30分钟,再洗涤后加底物显色30分钟。在二步法实验过程中因为增加了孵育后洗板后再加酶,从而有效地减少因检测物浓度过高而产生的“钩状效应”(HOOK),避免一步法可能导致的假阴性结果而产生的漏检,从而更有利地保证了血液的安全。
中心检验科常规检测有8种酶免检测试剂,其中有5种试剂需由一步法调整为二步法。今年2、3月份检验科完成了二步法试剂HIV抗体、HCV抗体、梅毒抗体、HBsAg项目的各一种试剂确认工作,已有4种试剂用于常规检测,预计4月份开始5种二步法试剂将全部用于常规检测。
与一步法相比,在实际操作中最突出的变化是检测时间的延长,就一块酶免反应板来说,二步法的实验时间由原来一步法的1.5小时延长至2.5小时,时间延长了1小时。按现在单个实验室平均每天700-1000份标本估计,各项目平均检测时间一步法需4小时、二步法需6.5小时,检测时间延长2.5个小时;若标本量达到1200份时,各项目平均检测时间将延长3.5小时。检验科的全体职工群策群力,努力调整工作流程,从而保证这项工作顺利转接,保证检测质量,保障血液安全。
郑岚 撰稿 谢云峥 周国平审校